只因不小心被一只受过放射性感染的蜘蛛咬伤，平凡瘦弱的高中生彼得·本杰明·帕克（尼尔·帕特里克·哈里斯 Neil Patrick Harris 饰）的人生便发生了翻天覆地的变化。从此以后，他穿上红蓝相间的紧身服，戴上面具，凭借发射出的蜘蛛丝穿梭在喧哗闹市的每一个角落。“能力越大，责任越大”，彼得以蜘蛛侠的身份，和破坏城市及世界和平的恶势力作斗争。全新的征程，更强大的敌人，女武士鹿田、The Talon、电王（Ethan Embry 配音）、蜥蜴人（罗布·赞比 Rob Zombie 配音）、银貂（Virginia Madsen 配音）等可怕对手相继登场。蜘蛛侠从不退却，勇敢地迎上前去……本片为采用3D技术制作的新版动画。
演员：乔什·布雷纳 加里·安东尼·威廉斯 凯蒂·洛斯 克里斯·帕内尔 特罗伊·贝克 凯文·杰克逊 弗雷德·塔特西奥 安东尼·马克·巴罗 查特尔·巴里 派瑞·申 泰姆·温特斯 詹姆斯·普雷斯顿·罗杰斯 杰森·弗莱明 艾洛蒂·袁 马克斯·福勒 麦肯兹·戴维斯 霍莉·杰德 大卫·沙特罗 乔尔·麦克哈尔 赛斯·格林 加布里埃尔·鲁纳 史蒂夫·布卢姆 安德鲁·基希诺 罗莎里奥·道森 杰森·乔治 克雷格·费格森 丹·史蒂文斯 乔·曼根尼罗 克里斯蒂·瑟拉图斯 杰·科特尼 诺希尔·达拉尔 斯坦顿·李 杰夫·辛 黛布拉·威尔逊
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演员：塔拉·斯特朗 Doc Harris 约翰·德·兰西 阿尔文·桑德斯 安德莉亚·利布曼 凯莉·谢里丹 阿什莉·鲍尔 Nicole Oliver 塔比莎·杰曼 凯西·薇瑟乐克 凯瑟琳·巴尔 Sunni Westbrook Mark Acheson 安德鲁·弗朗西斯 布瑞特·麦考利普
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演员：米夏埃尔·桑泰尔尼克拉斯 韦恩·格雷森 萨姆·里格尔 Gregory Abbey Darren Dunstan 马克·汤普森 Ted Lewis Oliver Wyman 杰森·格里菲斯 埃里克·斯图尔特 Frederick B. Owens 丹·格林 J. David Brimmer
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